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                    GPC的應用之植物油中9種抗氧化劑的測定分享

                    2022-09-23

                    實驗室配置了GPC,有什麼用呢?

                    樣品的性質不同,對應的分離原理不同,如果前處理過程中增加GPC,等于增加了分離或淨化的過程。

                    在對各類食品、農産品、水産品和中藥材中的農殘、半揮發性有機物分析時,樣品中一般會含有大分子物質(如色素、油脂等),如果不去除這些物質,會影響更終的分析結果及色譜柱的使用壽命。

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                    針對此問題,在農殘、半揮發性有機物的樣品分析前,必須進行有效的淨化前處理。如果實驗室中有GPC那就事半功倍了。接下來我們不妨了解一下GPC在液相中的應用。

                    GPC的分離原理

                    一種含有不同分子的樣品溶液緩慢地流經凝膠色譜柱時,各分子在柱内同時進行着兩種不同的運動:垂直向下運動和無定向的擴散運動。

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                    大分子物質由于直徑較大,不易進入凝膠顆粒的微孔,而隻能分布顆粒之間,所以在洗脫時向下移動的速度較快。

                    小分子物質除了可在凝膠顆粒間隙中擴散外,還可以進入凝膠顆粒的微孔中,即進入凝膠相内,在向下移動的過程中,從一個凝膠内擴散到顆粒間隙後再進入另一凝膠顆粒,如此不斷地進入和擴散,小分子物質的下移速度落後于大分子物質,從而使樣品中分子大的先流出色譜柱,中等分子的後流出,分子更小的更後流出。

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                    GPC的作用

                    ● 淨化樣品,去除樣品中的大分子基質或者小分子幹擾物質,淨化後适合采用GC,HPLC,GCMS等儀器的分析,例如食用油中抗氧化劑、多環芳烴等的測試,須通過凝膠淨化前處理方式去除油脂等幹擾物,将待分析物和幹擾物分離開。

                    ● 保護分析儀器及色譜柱,防止大分子物質堵塞後續分析用色譜柱及儀器。

                    GPC的應用案例

                    植物油中9種抗氧化劑的測定(凝膠滲透色譜法)。

                    01、适用範圍

                    食品中PG、THBP、TBHQ、NDGA、BHA、Ionox-100、OG、DG和BHT等九種抗氧化劑的測定。

                    參考标準:《GB 5009.32-2016 食品安全guo家标準 食品中9種抗氧化劑的測定》。

                    02、原理

                    油脂樣品經有機溶劑溶解後,使用凝膠滲透色譜(GPC)淨化。

                    03、标準溶液的配置

                    分别稱取沒食子酸丙酯(PG),叔丁基對苯二酚(TBHQ),去甲二氫愈木創酸(NDGA),叔丁基對羧基茴香醚(BHA),2, 6-二叔丁基-4-羧甲基苯酚(lonox-100),沒食子酸辛酯(OG),2, 6-二叔丁基對甲基苯酚(BHT),沒食子酸十二酯(DG)10mg,用乙腈溶解并定容到10mL,得1000μg/mL的單标。

                    稱取2, 4, 5-三羧基苯丁酮(THBP)1mg,用乙腈溶解并定容到10mL,得單标100μg/mL。

                    流動相配制:1L環己烷和1L乙酸乙酯等比例混勻。

                    04、提取步驟

                    精确稱取取1g油樣于10mL容量瓶中,以流動相定容至刻度,待淨化。

                    加标過程:精确稱取取1g油樣于10mL容量瓶中,精确加入0.2mL100μg/mL9種抗氧化劑混标,以流動相定容至刻度,得加标量為20mg/kg,上機濃度為5μg/mL。

                    05、凝膠色譜淨化條件

                    GPC譜圖

                    儀器型号:月旭科技GPC1600凝膠色譜儀。

                    色譜柱型号:月旭Bio-Beads S-X3凝膠色譜柱,400mm×25mm;

                    流動相:乙酸乙酯-環己烷(1:1);

                    流速:5.0mL/min;

                    進樣量:5.0mL;

                    收集時間:14-25min;

                    波長:254nm。

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                    06、液相色譜分析條件

                    色譜柱:月旭Ultimate® XB-C18,5μm,4.6×250mm。

                    流動相:A:0.5%甲酸水溶液;B:甲醇;

                    流速:1mL/min;

                    進樣量:5μL;

                    柱溫:35℃;

                    檢測波長:280nm;

                    梯度洗脫表:見表1。

                    表1 梯度洗脫表


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                    07、液相色譜圖和加标回收率結果

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                    結果展示

                    GPC-1600凝膠色譜儀加标回收率彙總表

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                    我們可以看到使用月旭凝膠柱對植物油中9種抗氧化劑淨化提取,回收率80-101%,結果滿足要求。

                    産品信息

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