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                    中藥成分液相分析常見問題——前沿峰

                    2022-09-23

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                    01、造成前沿峰的原因

                    1. 柱過載

                    每一根色譜柱都有其更大樣品承載量,當樣品量過多時會出現超載現象,包括質量過載和體積過載。

                    2.色譜柱損壞

                    色譜柱在長時間使用之後就會導緻矽膠填料的溶解,柱床崩解,從而柱效降低導緻峰前沿。

                    3.峰幹擾

                    兩個化合物共洗脫,即在大峰前有小峰出現,色譜峰沒有分開。

                    4.樣品溶劑的影響

                    當樣品溶劑的洗脫能力大大強于流動相時會出現前沿峰。

                    具體就是說,樣品在色譜柱中均勻的往前移,我們通常會得到呈正态分布的的峰。當樣品溶液進樣後到達色譜柱的時間比較短,在未被流動相充分稀釋時,由于洗脫能力比較強的樣品溶劑存在,使部分樣品被洗脫的速度加快,快速通過色譜柱,更終導緻峰前延。

                    中藥成分分析項目中,提取溶劑通常為乙醇、甲醇、乙酸乙酯等洗脫強度較強的溶劑,此時易發生“樣品溶劑的洗脫強度遠遠超過流動相”的情況,為避免前延峰出現,可以用通過“流動相稀釋提取液”或降低“進樣體積”的方式。

                    02、應用案例

                    牛蒡子的含量測定

                    色譜條件:

                    色譜柱:Ultimate® AKL-C18(4.6×250mm,5μm)。

                    流速:1.0mL/min;

                    流動相:甲醇:水=1:1.1;

                    檢測波長:280nm;

                    柱溫:30℃;

                    進樣體積:10μL。

                    色譜圖:

                    (1) 标準品

                    微信截圖_20220923134047.png結論:牛蒡苷峰形前沿,将進樣體積降低至5μL,結果如下:

                    微信截圖_20220923134103.png

                    結論:通過降低進樣體積有效改善了牛蒡苷的峰形,結果可滿足《中國藥典2020版》中相關要求。

                    03、産品信息

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