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                    何首烏中黃曲黴毒素的檢測

                    2022-06-23

                    何首烏(學名:Fallopia multiflora (Thunb.) Harald.),又名多花蓼、紫烏藤、夜交藤等。是蓼科蓼族何首烏屬多年生纏繞藤本植物,塊根肥厚,長橢圓形,黑褐色。生山谷灌叢、山坡林下、溝邊石隙。産陝西南部、甘肅南部、華東、華中、華南、四川、雲南及貴州。其塊根入藥,可安神、養血、活絡,解毒(截瘧)、消癰;制首烏可補益精血、烏須發、強筋骨、補肝腎,是常見貴細中藥材。但是在存儲的過程中容易被真菌毒素污染,故需要對其檢測。藥典上尚未收載,基體幹擾較大,月旭的免疫親和小柱能很好的淨化。


                    免疫親和柱:Welchrom® Aflatoxin B1、B2、G1、G2。

                    規格:3mL,15/pk。

                    前處理

                    稱取2g樣品于離心管中,加入10mL 70%甲醇水,渦旋2min,超聲15min,6000r/min離心5min,移取2mL+15mLPBS溶液,混勻,用玻璃濾紙過濾,備用。

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                    常規過柱、淨化方式

                    備用溶液全部通過免疫親和柱,速率1s/滴,10mL PBS淋洗,抽幹,1mL甲醇浸泡1min,收集全部甲醇溶液,混勻,上機。

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                    常規的淨化方式,并不能洗脫所有雜質,而且這些雜質會顯著影響黃曲黴B1、B2、G1、G2的出峰,且無法通過改變色譜條件來實現分離。

                    淋洗液添加吐溫20的淨化方式

                    備用溶液全部通過免疫親和柱,速率1s/滴,10mL吐溫20PBS淋洗,抽幹,1mL甲醇浸泡1min,收集全部甲醇溶液,混勻,上機。

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                    上圖中為添加了1%、2%、4%、10%的吐溫20PBS淋洗液。從圖譜結果來看,4中添加量的吐溫20PBS溶液都同樣起到了顯著的淨化效果。如果用免疫親和柱法來檢測其他樣品基質中的黃曲黴毒素時出現類似的幹擾情況,也可以嘗試用不同濃度的吐溫20淋洗,以達到淨化的目的。