提示

                    首頁 > 新聞動态 > 反相離子對色譜法建立的注意事項(二)

                    反相離子對色譜法建立的注意事項(二)

                    2022-06-23

                    今天小編再給大家分享一些注意事項:


                    方法調整

                    有機相,pH值,進樣量,柱溫等。


                    有機相

                    微信截圖_20220623100909.png


                    案例

                    色譜條件

                    色譜柱:月旭Ultimate® XB C18(4.6×250,5μm)。

                    流動相:A相:磷酸鹽緩沖液(磷酸二氫鉀6.8g/L,磷酸調整pH=2.5);  

                    B相:甲醇/乙腈/四氫呋喃;

                    檢測器:280nm;

                    柱溫:30℃;

                    流速:1.0ml/min;

                    進樣量:10μL;

                    樣品溶劑:A相;

                    樣品溶液:L-去甲腎上腺素、腎上腺素、L-酪氨酸、多巴胺用溶劑配置成濃度均為:0.2mg/mL。


                    B相:6%乙腈

                    微信截圖_20220623100955.png

                    B相:10%甲醇

                    微信截圖_20220623101451.png

                    B相:2.5%四氫呋喃

                    微信截圖_20220623101559.png

                    讨論:在使用相似洗脫能力的有機相比例的情況下,同時檢測L-去甲腎上腺素、腎上腺素、L-酪氨酸、多巴胺4種物質,常用的甲醇,乙腈,四氫呋喃三種有機溶劑具有不同的分離結果,可以根據表《溶劑的選擇性特征》進行篩選。

                    pH值

                    微信截圖_20220623101643.png

                    讨論:針對于易解離的物質,不同的pH會導緻物質的解離程度不一樣,進而引起保留時間的差異,反相離子對色譜法中需要物質成為統一的解離狀态

                    微信截圖_20220623101654.png