樣品前處理是一項極其耗時、繁瑣且容易引入分析測定誤差的過程。樣品前處理方法對樣品的分析起着至關重要的作用，某種程度上來說，前處理決定了分析測試的結果，本文為大家呈現了一種常見的樣品前處理方法-固相萃取，它的一些原理與操作。

01 固相萃取吸附劑與目标化合物之間的作用機理

固相萃取主要是通過固相吸附劑上的官能團與目标化合物的官能團之間的作用力來保留/吸附的，這種作用力可分為非極性作用力、極性作用力、離子作用力、共價作用力等。

非極性作用力：對于鍵合矽膠及聚合物吸附劑而言，非極性作用力産生于固相萃取材料官能團上的碳氫鍵與目标化合物的碳氫鍵之間，常常被用于從樣品基質中吸附分離具有非極性結構的目标化合物。如Welchrom® C18、Welchrom® C8、Welchrom® Phenyl等。

極性作用力：極性作用力發生在許多固相萃取材料極性表面與樣品中目标化合物的極性官能團之間，常見的具有極性作用力的吸附劑在色譜中一般都稱為正相色譜吸附劑。常見的極性固相萃取材料包括：矽膠、氧化鋁、弗洛裡矽土及含有氰基、氨基、二醇基的鍵合矽膠。

離子作用力：離子作用力發生在帶相反電荷的目标化合物與固相萃取吸附劑官能團之間。如強陽離子交換劑 Welchrom® SCX、強陰離子交換劑Welchrom® SAX、弱陽離子交換劑Welchrom® WCX等。

共價作用力：共價作用力發生在共價填料與目标化合物之間，共價鍵不易被打斷，但有的官能團形成的共價鍵在改變溶劑環境的條件下是可逆的，如苯硼酸基。

02 pH值對固相萃取的影響

pH值可以改變目标物/吸附劑的離子化或質子化程度。對于強陽/陰離子交換柱來講，因為吸附劑本身是完全離子化的狀态，目标物必須完全離子化才可以保證其被吸附劑完全吸附保留。而目标物的離子化程度則與pH值有關。如對于弱堿性化合物來講，其pH值必須小于其pKa值兩個單位才可以保證目标物完全離子化，而對于弱酸性化合物，其pH值必須大于其pKa值兩個單位才能保證其完全離子化。對于弱陰/陽離子交換柱來講，必須要保證吸附劑完全離子化才保證目标物的完全吸附，而溶液的pH值必須滿足一定的條件才能保證其完全離子化。

03 固相萃取操作步驟

針對填料保留機理的不同（填料保留目标化合物或保留雜質），操作稍有不同。

目标化合物保留模式

固相萃取操作一般有四步：

①活化----除去小柱内的雜質并創造一定的溶劑環境。

②上樣----将樣品用一定的溶劑溶解，轉移入柱并使組分保留在柱上。

③淋洗----Z大C度除去幹擾物。

④洗脫----用小體積的溶劑将被測物質洗脫下來并收集。（注意流速不要過快）

雜質保留模式

固相萃取操作一般有三步：

①活化----除去柱子内的雜質并創造一定的溶劑環境。

②上樣----将樣品轉移入柱，此時大部分目标化合物會随樣品基液流出，雜質被保留在柱上，故此步驟要開始收集。

③洗脫----用小體積的溶劑将組分淋洗下來并收集，合并收集液。（注意流速不要過快）

04 固相萃取柱（SPE）使用特點

樣品溶液體系性質要與固相萃取要求相适應。例如：在C18吸附待測化合物的模式中，樣品溶液體系中有機溶劑的比例不能太高；在C18吸附樣品基質的模式中，樣品溶液體系中有機溶劑的比例不能太低。

要注意填料承載能力，防止上樣超載導緻檢測結果不準确。

過柱流速要合适，不能過快或過慢，特别是樣品溶液上柱和洗脫兩個環節的過柱速度要控制。一般過柱流速為1~3mL/min。

對于使用矽膠基質的SPE小柱在樣品溶液上柱前不能幹涸。如果幹涸了應該重新對小柱進行活化。