
2021-02-02
很多小夥伴對選擇一根合适的制備柱而困擾,本文介紹了制備型色譜柱的一些選擇要點。
什麼是制備型色譜柱
制備的目的是從混合物中得到純物質,即分離-純化-目标物,制備柱則是完成這一過程的工具。制備柱固定相種類和分析柱類似,制備柱的特點是:
1、柱長短,内徑大
為了加快分離時間和提高分離效率,制備色譜的進樣品量會很大,一般制備柱柱長為50mm-250mm,而内徑為10mm-50mm。
2、流速高
流動相流速一般在10-20ml/min,可以提高産率,降低生産成本。
如何選擇一款合适的制備柱
第一步:選擇合适的鍵合相
目前市場需求來看,蛋白質、多肽等類的物質分離純化十分普遍,其中以C18、C8、C4的鍵合相居多,月旭科技提供完整的鍵合相産品線。
第二步:選擇合适的填料粒徑和孔徑
根據化合物的性質來選擇合适的填料粒徑和孔徑
由分子量選擇合适的孔徑
由壓力耐受性和分離難度來選擇合适的粒徑
第三步:由上樣量大小和樣品特性選擇合适的柱管
第四步:确定合适的流速和上樣量
制備柱的流速一般與直徑的平方成正比,舉例:4.6mm分析柱流速為1ml/min,則10mm制備柱約為4.7ml/min。
上樣量選擇過載上樣,特點是節約溶劑、節省時間、增加柱子的使用率,但是過載越多,分離度越差,一般以目标化合物與雜質分離度1.5為标準。上樣量可以依據下式計算:
Ultimate®系列制備柱
采用與分析柱所用填料完全相同,保證了分析規模和制備規模的良好重現性,支持直線放大;獨特的裝柱技術和全不鏽鋼的modular柱管,保證了柱床的穩定性,經過測試10μm理論塔闆數>35000/m,5μm理論塔闆數>75000/m,峰的對稱性值為0.95~1.20;還有上樣量高、支持線性放大、制備時間短、節約溶劑等特點。
更好的柱效和封尾
更好的分離效率、易于線性放大
不同内徑的柱子能得到同樣完美分離