在做樣分析過程中，經常會出現色譜峰圖異常的現象，比如前沿或者拖尾，這給我們的分析檢測造成了很大的困擾，而超載是導緻峰形異常的原因之一，接下來首先介紹一下超載：

一、超載：

當供試品進樣量和進樣體積在安全的範圍内，改變進樣量和體積會相應地影響到峰高和峰面積，而保留時間、峰寬和分離度的影響并不大，但當進樣體積或者質量很大的時候，就會造成超載現象，伴随着峰寬增加、峰型變差和分離度降低。

柱長在50~250mm，内徑4~5mm的色譜柱，單個樣品的進樣質量應該在50μg以内，進樣體積小于25 μL。超載分為體積超載和質量超載兩種，下面将分别對這兩個超載對分離的影響做介紹。

（1）體積超載：下圖分别是1mg/mL的連翹苷10、40、60、80、100 μL的色譜圖，可以看到10 μL的峰形更好，40 μL已經出現前延，而随着進樣體積的增大，會愈發明顯。

（2）質量超載：下圖是氨基酸及其衍生物的測定，正常質量和超大質量所表現出的峰形。

超載會影響到色譜峰形，當進樣體積和質量在合适的範圍内，是獲得良好峰形的保證，而又有哪些因素可以導緻前延和拖尾呢，下面我們接着說。

二、前延：（拖尾因子Tf<0.95）

1. 溶劑效應的影響

（1）用流動相溶解樣品：（姜黃素标準品）

a.用純甲醇溶解樣品                      b.用流動相溶解樣品   

（2）先強溶劑溶解樣品，然後用流動相稀釋：（石杉堿甲标準品）

2、緩沖作用不合适：（注射用苦參堿）

a. 流動相為：乙腈：3%磷酸：無水乙醇＝80：10：10

b.流動相為：（乙腈：3%磷酸：無水乙醇＝80：10：10）：50mM磷酸二氫鈉＝80：20

3、儀器系統不合适：

當使用月旭超高效色譜柱（Ultimate® XB-C18，4.6×50mm，1.8μm）、常規的液相色譜儀搭配使用時，由于系統死體積大，會影響到峰形，下圖是羅氟斯特項目，可以看到色譜峰都出現了前延的現象。

三、拖尾：（拖尾因子Tf>1.05）

1. 降低pH，抑制矽羟基的電離

2、增加緩沖鹽，加大緩沖作用

3、因為每種緩沖鹽的緩沖能力不一樣，可以通過更換緩沖鹽來調整：

4、屏蔽矽羟基的影響（如加入三乙胺）

在我們進行定性定量的檢測分析時，色譜峰形對我們的實驗結果有較大影響，因而保證良好的峰形，是我們實驗成功的關鍵，而排查和解決異常峰形問題自然也是我們實驗分析的重要技能。