酸性紅1，是一種工業染料，它有4個别名：偶氮熒光桃紅、偶氮焰紅，酸性紅G，食品紅10。

它的長相是這樣的：

哇！！一看就不是什麼能吃的東西啊！

然鵝，就是有一些不法商販會在食品中添加酸性紅1，目前我國尚無相關的檢測标準。月旭科技親自采購了酸性紅1标準品、從各大超市采購紅酒、紅棗、火腿腸、酸奶作為實際樣品，開發出食品中酸性紅1檢測的方法。該方法快速高效，靈敏度高，重現性好。

1、适用範圍
适用于紅酒、紅棗、火腿腸、酸奶等基質中酸性紅1的檢測。

參考标準：《GB 5009.35-2016 食品安全國家标準食品中合成着色劑的測定》

目前酸性紅1還沒有具體的标準，我們根據GB 5009.35-2016的方法，優化了提取步驟，使樣品在過PA小柱後，回收率高，淨化效果好，方法穩定性好。

2、相關試液的配置

1) 準确稱取酸性紅1标準品50mg，用10%甲醇水溶液溶解并定容到50mL，得到1000µg/mL标準儲備液

2) 準确移取酸性紅1标準儲備液 1000µg/mL 5mL，用10%甲醇水溶液稀釋并定容到50mL，得到10µg/mL标準使用液

3) 提取液A配置：取100mL乙醇，50mL乙腈互溶；然後取其中140mL乙醇：乙腈（2：1）混合液，加入60mL水和2mL的氨水。

4) 檸檬酸溶液：稱取 20 g 檸檬酸（C6H8O7·H2O），加水至 100 mL，溶解混勻。

5) pH=6 的水：500ml的水加檸檬酸溶液調節至 pH 到 6，如果水pH偏低于6可以直接使用。

6) pH=4的水:500ml的水加檸檬酸溶液調節至 pH 到 4。

7) 甲醇：甲酸（6：4）：取甲醇150mL+甲酸100mL。

8) 洗脫劑：先取2mL的氨水定容至100mL成為2%的氨水溶液；再用20mL的2%氨水溶液加70mL乙醇加10mL水。

9) 10%甲醇：10mL甲醇加90mL水。

10) 乙酸铵溶液（0.02mol/L）：稱取1.54g乙酸铵，加水至1000mL，溶解，經0.45µm濾膜過濾。

3、提取步驟

一、紅酒

取1mL樣品加入0.3mL甲酸，振蕩，待淨化。

二、紅棗

（1）将1.000g樣品置于50 mL 離心管，加入20mL提取液A，振蕩2min，60℃水浴超聲10min，6000rpm下離心2min，收集上清液；

（2）再向下清液加入提取液A10mL，振蕩2min，水浴超聲10 min，6000rpm下離心2min，收集上清液；

（3）重複（2）的過程。收集3次上清液，再次6000rpm下離心2min（為了使上清液固體顆粒減少，從而加快上樣等步驟）；

（4）在40℃水浴條件下，減壓蒸至約12mL，再加3mL甲酸混勻，待淨化。

三、火腿腸

（1）将1.000g樣品置于50 mL 離心管，加入1.0gC18粉末，加入20mL提取液A，振蕩2min，60℃水浴超聲10min，6000rpm下離心2min，收集上清液；

（2）再向下清液加入提取液A10mL，振蕩2min，水浴超聲10 min，6000rpm下離心2min，收集上清液；

（3）重複（2）的過程。收集3次上清液，再次6000rpm下離心2min（為了使上清液固體顆粒減少，從而加快上樣等步驟）；

（4）在40℃水浴條件下，減壓蒸至約12mL，再加3mL甲酸混勻，待淨化。

四、酸奶

（1）将1.000g樣品置于50 mL 離心管，加入20mL提取液A，振蕩2min，60℃水浴超聲10min，6000rpm下離心2min，收集上清液；

（2）在40℃水浴條件下，減壓蒸至約7mL左右，再加1.5mL甲酸混勻，待淨化。

4、SPE淨化步驟
SPE柱：月旭Welchrom® PA(聚酰胺)小柱，規格：1000mg/6mL。

a)活化：加入5 mL甲醇活化Welchrom® PA柱，5mL水，5mL pH=6的水，棄去流出液。

b)上樣：将提取液加入Welchrom® PA柱中，棄去流出液，注意不要讓小柱溶劑流幹。

c)淋洗：依次用10mLpH=4的水，20mL甲醇：甲酸（6：4），10mLpH=7的水淋洗，棄去流出液。

d)洗脫：用15mL2%氨水：乙醇：水（2+7+1）洗脫，收集流出液，壓幹小柱。

e)濃縮：将收集的洗脫液在80℃水浴蒸幹，再用10%甲醇水複溶并定容至2mL。

6、色譜條件

色譜柱：月旭Ultimate®XB-C18（4.6 x 250 mm, 5 μm）
流動相：乙酸铵/乙腈梯度；

流速：1.0 mL/min
進樣量：20 μL
柱溫：30 ºC
檢測波長：534 nm

7、色譜圖或者加标回收率結果

圖1：酸性紅1标準品0.5mg/L 

圖2：酸性紅1-紅酒加标10mg/kg

、

圖3：酸性紅1-紅棗加标1 mg/kg

圖4：酸性紅1-火腿腸加标1 mg/kg

圖5：酸性紅1-酸奶加标1mg/kg

表1：加标回收率測定結果

8、結論

使用月旭Welchrom® PA柱可以快速、高效檢測紅酒、紅棗、火腿腸、酸奶中的酸性紅1，方法的靈敏度高，重現性好。

9、相關産品信息